Care este diferența dintre nitroceluloză și membrana PVDF

În timp ce atât membranele de nitroceluloză, cât și PVDF sunt utilizate pentru Western blot și analiza aminoacizilor, nitroceluloză este ideală în detectarea proteinelor cu greutate moleculară mică, în timp ce PVDF este mai potrivită pentru detectarea proteinelor cu greutate moleculară mai mare.

1. Ce este o membrană de nitroceluloză?
2. Ce este o membrană PVDF?
3. Cum utilizați membrana de nitroceluloză?
4. Poate proteina să treacă prin membrana PVDF?
5. Care sunt avantajele și dezavantajele membranelor PVDF și nitroceluloză?
6. Pentru ce se folosește nitroceluloză?
7. Cum păstrați membranele PVDF?
8. Ce înseamnă PVDF?
9. Cum se aplică acoperirea PVDF?
10. Care este dimensiunea porilor nitrocelulozei?
11. De ce îmbibați membrana PVDF în metanol?
12. De ce a fost necesar transferul către membrana PVDF?

Ce este o membrană de nitroceluloză?

Membranele nitrocelulozice sunt o matrice populară utilizată în ștergerea proteinelor datorită afinității lor ridicate de legare a proteinelor, compatibilității cu o varietate de metode de detectare (chemiluminescență, cromogenă și fluorescență) și capacității de a imobiliza proteinele, glicoproteinele sau acizii nucleici..

Ce este o membrană PVDF?

Membranele cu fluorură de poliviniliden (PVDF) leagă biomoleculele prin interacțiuni hidrofobe. Porii membranei măresc suprafața de legare a suprafeței în timp ce restricționează dimensiunile proteinelor legate. ... Are o capacitate mai mare de legare a proteinelor și o retenție mai mare decât membranele de 0,45 µm.

Cum utilizați membrana de nitroceluloză?

Nitroceluloză - Așezați membrana direct într-un vas de mică adâncime care conține 50 ml de tampon de transfer 1X timp de câteva minute. Hârtie de filtru - Înmuiați scurt hârtia de filtru în tamponul de transfer 1X imediat înainte de utilizare. Gel — Folosiți gelul imediat după alergare.

Poate proteina să treacă prin membrana PVDF?

50-60%, întrucât pot trece într-adevăr membrana de transfer și se pot pierde. Pentru proteinele mai mari, ar trebui să reduceți procentul de gel pentru a crește mobilitatea proteinelor. ... Puteți face, de asemenea, un test simplu al proteinei prin introducerea unei a doua membrane în spatele membranei primare.

Care sunt avantajele și dezavantajele membranelor PVDF și nitroceluloză?

PVDF are o capacitate de legare a proteinelor de 170 la 200 μg / cm² în timp ce nitroceluloză are o capacitate de legare a proteinelor de 80 până la 100 μg / cm². Deoarece PVDF are o capacitate mai mare de legare a proteinelor, oferă și o sensibilitate mai mare.

Pentru ce se folosește nitroceluloză?

Guncotton sau nitroceluloză (cunoscută și sub numele de trinitroceluloză și azotat de celuloză) este un exploziv ușor, utilizat în rachete, propulsori, baze de cerneală tipografică, finisare piele și celuloid (un amestec de nitroceluloză și camfor; folosit pentru prima dată la fabricarea bilelor de biliard).

Cum păstrați membranele PVDF?

Pentru a depozita membranele PVDF pentru o perioadă lungă de timp, acestea ar trebui să fie stivuite în material non-biodegradabil cu o temperatură de ~ 4 ° C. Merită menționat faptul că membranele trebuie să fie complet uscate înainte de depozitare.

Ce înseamnă PVDF?

PVDF este abrevierea pentru fluorură de poliviniliden, care poate fi denumită și PVF2. Acest polimer face parte dintr-o clasă de materiale cunoscute sub numele de fluorocarburi sau fluoropolimeri, care se caracterizează prin stabilitate termică ridicată și rezistență chimică excelentă.

Cum se aplică acoperirea PVDF?

Acoperirea cu pulverizare PVDF utilizează o pompă cu membrană sau o pompă cu piston pentru a aplica presiune și electricitate statică pentru pulverizare. Stratul de pulbere este pulverizat prin agitare sau inhalare, iar pulberea electrostatică este pulverizată pe gura pistolului. Uscarea PVDF poate fi atât uscarea naturală, cât și coacerea.

Care este dimensiunea porilor nitrocelulozei?

Membrana de nitroceluloză de 0,2 µm a porțiunii Bio-Rad este densă 100% nitroceluloză. Nitroceluloză pură este membrana cea mai frecvent utilizată pentru transferul atât de proteine, cât și de acizi nucleici.

De ce îmbibați membrana PVDF în metanol?

O clătire scurtă (15-30 de secunde) în metanol (sau alt alcool 100% (etanol sau izopropanol)) înainte de transferul Western va „hidrata” membrana și va permite transferul îmbunătățit și legarea de proteine. Membranele nitrocelulozice sunt hidrofile, deci pot fi complet hidratate cu tampoane apoase.

De ce a fost necesar transferul către membrana PVDF?

După terminarea electroforezei, proteinele trebuie transferate din gel pe o membrană adecvată pentru colorarea și detectarea anticorpilor. PVDF este în general mai bun pentru proteinele cu greutate moleculară mică. ... Această membrană poate fi achiziționată în diferite dimensiuni ale porilor.